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HEPA1-6小鼠肝癌細胞傳代/復蘇技巧
更新時間:2024-06-10 點擊量:347

HEPA1-6小鼠肝癌細胞

HEPAI6 ,HEPAI-6

貨號:YJ-m019(種屬鑒定)

價格: 2000.0

規格: 1*10 6

細胞介紹

此細胞株是C57/L小鼠中產生的BW7756小鼠肝癌細胞的衍生株。檢測表明鼠痘病毒(ectromelia virusECTV)陰性。每個批次均通過本庫支原體檢測,結果為陰性。

細胞特性

1 來源:肝

2 形態:上皮樣細胞  貼壁生長

3 含量:>1x106  細胞數

4 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途:僅供科研使用。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T251-2mLT752-3mL),置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml10%FBS的培養基來終止消化。 

3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

HEPA1-6小鼠肝癌細胞.png

下面T25瓶為例;

1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數板計數,來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數、日期等信息。

3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。

 

 

 

 

 

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實驗技術服務:


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