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酵母蛋白抽提試劑盒說明書
更新時間:2020-11-09 點擊量:1683

                                                                                                                    

酵母蛋白抽提試劑盒說明書

 

Yeast Protein Extraction Kit

目錄號:K0890   

保存:蛋白酶抑制劑混合物:-20℃

    其它組分:室溫  

 

組分說明

 

Catalog no.                   K0890       K0890A

Kit Size                      25  次       100  次

Yeast Protein Extraction Reagent           25 ml       100 ml

蛋白酶抑制劑混合物                         250  μl        1 ml

 

產品簡介

 

      酵母蛋白抽提試劑用于從酵母細胞中快速,高效而溫和地抽提可溶性蛋白。采用試劑處理,可以避免激烈的機械處理造成的氧化和熱度升高對目的蛋白的破壞作用。使用方便,避免了重復性差的研磨法,超聲波法或壓榨法對酵母細胞的破壞。本抽提試劑可用于提取啤酒酵母、裂殖酵母、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌及革蘭氏陽性菌的蛋白抽提。與傳統方法相比,

處理得到的提取液中可溶蛋白產量大,活性高,提取快速;提取液可以直接用于 Ni-NTA  、GST 等親和純化。酵母蛋白抽提試劑盒中帶有蛋白酶抑制劑混合物,可有效避免蛋白提取過程中蛋白的降解。

 

注意事項

 

 1. 提取液中含有去污劑,不宜使用受去污劑干擾的蛋白定量方法。

 

 2. 為了獲得實驗j效果,請根據實驗調整Z佳使用量。

 

 3. 本產品僅用于科研。

操作步驟  

 

 1.  酵母培養液3000 xg,4℃,離心5分鐘(離心后馬上抽提或置于-20℃或-80℃保存)。

 

 2.  請在蛋白抽提前取出實驗所需蛋白抽提試劑進行預冷,  按照1:99比例加入蛋白酶抑制劑混合物(例如990μl抽提試劑中加入10μl蛋白酶抑制劑混合物),使蛋白酶抑制劑混合物在抽提試劑中成1×工作液。

 

     注意:在進行蛋白抽提前2-3分鐘內加入蛋白酶抑制劑混合物。

 

 3.  按照每50 mg酵母加入500  μl酵母蛋白抽提試劑加入抽提液,渦旋振蕩或上下吸打使酵母充分重懸。

 

 4.  將細胞懸液置于冰上,孵育20分鐘(每間隔幾分鐘輕微搖晃一下)。

 

 5.  12,000 rpm(13,400 xg)離心10分鐘取上清(可提取超過90%的可溶性蛋白,如有需要,可將沉淀進行第二次蛋白抽提)。

 

 6.  上清可進行下一步的蛋白含量測定、純化及分析。

 

 

 

實驗代做服務:

ELISA試劑盒免費代檢測

CCK8檢測

HE染色

蛋白相互作用分析

Western Blot

免疫組化IHC染色

熒光定量PCR

動物模型服務

流式細胞檢測

免疫熒光染色

激光共聚焦

DNA甲基化實驗

石蠟/冰凍切片

透射電鏡服務

掃描電鏡實驗

蛋白雙向(2-D)

動物實驗

免疫共沉淀

原位雜交(FIsh)

蛋白質純化

分子克隆和質粒載體構建服務

組蛋白甲基化磷酸化乙酰化

 

蛋白雙向2D-WB

 

藥理毒理動物實驗

 

番紅O固綠染色

明膠酶譜MMP

酶活性檢測

動物造模/模型實驗服務

 

滬公網安備 31011802001677號

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