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堿性磷酸酶放大系統
更新時間:2011-06-22 點擊量:1440

1.堿性磷酸酶放大系統

堿性磷酸酶廣大系統包含多種放大機制:堿性磷酸酶不直接催化底物生成有色產物而是催化生成輔酶I(NAD+),輔酶I激活下一輪氧化還原反應,輔酶I啟動的反應為底物的顏色化學轉變提供條件.在供氫體的作用下,底物氧化/還原發生顏色變化.

2.微粒放大系統

每個適當的微粒表面可以同時結合或吸附大量的標記酶和抗體分子.在包含微粒放大系統的夾心ELISA法中,微粒通過結合于其上的第二抗體結合于*抗體.同時微粒上又結合著標記酶,其數量大大多于第二抗體能結合的標記酶,從而得以放大.

3.催化的顯示劑沉積

催化的顯示劑沉積(Catalyzed reporter deposition,簡稱CARD).CARD依次使用三套顯示劑:*套顯示劑是聯在抗體上的HRP,它通過抗體與待測抗原的反應結合于固相表面;第二套顯示劑是標有生物素的苯酚,它受到*顯示劑的氧化催化后沉積于固相表面;第三套顯示劑是標在鏈霉親和素(Streptavidin)上的AP,可被固相上的生物素捕獲,放大效果非常大.

 

 

滬公網安備 31011802001677號

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